摘要:
目的:研究DOK1重组腺病毒(Ad-DOK1)对棕榈酸(PA)诱导的胰岛素抵抗肝细胞(BRL-3A)胰岛素敏感性的调节作用机制。方法:对照组、溶剂组和模型组分别采用正常培养基、乙醇和棕榈酸处理BRL-3A细胞建立细胞胰岛素抵抗模型，并采用细胞葡萄糖摄取法鉴定细胞模型。对照组、空载组和腺病毒DOK1过表达组以正常血清、阴性病毒和Ad-DOK1(51257-1)转染胰岛素抵抗的BRL-3A细胞，并采用流式细胞仪检测腺病毒的转染效率，Western blot法检测DOK1、IRSI、IRSII、p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、SREBP1c蛋白表达水平。结果:棕榈酸诱导6 h,细胞内2-脱氧葡萄糖显著降低(P<0.05),DOK1蛋白表达水平降低(P<0.05),IRSI和IRSII蛋白表达水平无统计学差异(P>0.05),p-PI3K/PI3K比值无统计学差异(P>0.05),p-AKT/AKT比值降低(P<0.05),SREBP1c蛋白表达水平升高(P<0.05)。最佳MOI 60的DOK1重组腺病毒转染细胞后，相比于正常对照组，转染细胞内2-脱氧葡萄糖显著升高(P<0.05),DOK1蛋白表达水平升高(P<0.05),IRSI和IRSII蛋白表达水平无统计学差异(P>0.05),p-PI3K/PI3K比值无统计学差异(P>0.05),p-AKT/AKT比值升高(P<0.05),SREBP1c蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:Ad-DOK1可能通过调节AKT和SREBP1c增强BRL-3A细胞对胰岛素的敏感性。
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